8
當前位置：北京百奧創新科技有限公司>>產品>>培養基>> PRS-OCM-2DPRECEDO原代卵巢癌類器官培養基
產品名稱：PRECEDO原代卵巢癌類器官培養基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）
產品說明：PRECEDO原代卵巢癌類器官培養基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）是一種為促進人源卵巢癌原代細胞體外生長而開發的培養基。它是一種無菌的液體混合系統，含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質。培養基基于碳酸氫鹽的緩沖體系，在5%CO2、37℃培養箱中平衡時，pH值為7.4。該培養基的配方可以提供一個理想人源卵巢癌原代細胞體外培養環境，選擇性地促進體外人源卵巢癌原代細胞的生長。
產品優勢：
(1) 培養成功率高
(2) 體外持續擴增
(3) 保持腫瘤原始病理特征
(4) 藥敏結果宇臨床數據接近
使用說明：
?使用前準備
（1）預冷的DMEM/F12培養基稀釋基質膠（Corning#356231）（50倍稀釋，現配現用），并取適量*覆蓋培養容器，在5%CO2、37℃培養箱中包被培養容器底部0.5~3h，使用時棄上清。
（2）15mL無菌離心管、移液器、移液管、無菌槍頭等表面75%酒精消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min。
（3）提前30min從4℃冰箱取出*培養基平衡至室溫。
?卵巢癌原代細胞培養
（1）至少提前半小時使用稀釋后的基質膠預鋪培養瓶/板，使用前吸棄基質膠，用稀釋液潤洗一遍。
（2）將分離并計數后的細胞懸液參考表1中細胞數量接種于培養瓶/板，補加*培養基至所需體積，輕輕搖晃混勻，75%酒精表面消毒后置37℃、5%CO2培養箱培養。
（3）原代細胞初次接種后2-3天內勿動（利于細胞貼壁），第一次換液建議換半液。
?卵巢癌原代細胞傳代
（1）鏡下觀察細胞形成克隆，且匯合度達到85~95%時即可傳代。
（2）培養箱中取出細胞，棄舊培養液，0.05%胰mei洗滌5秒后吸盡，再加入適量0.05%胰mei，37℃孵育，2~5 min后拿出輕拍培養瓶/板側面，顯微鏡下觀察細胞消化情況。
（3）細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用原代細胞終止培養基終止消化，并將細胞轉移至離心管中，1500 rpm, 3 min。
（4）棄上清，以1-5mL條件培養基重懸細胞，活細胞計數，將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養瓶/板，（不同規格培養瓶/板底面積、接種原代細胞數量如表1所示），補加培養基至所需體積，十字交叉混勻，培養容器75%表面消毒后置37℃、5%CO2培養箱培養。其他步驟同上。
注意事項：
本產品在使用前需平衡至室溫。
使用產品時應注意無菌操作，避免污染。
本產品中不含血清，含有原代細胞專用抗生素，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可直接使用。
樣本需為腫瘤組織，且腫瘤細胞比例越高（>50%），培養成功率越高。
為保持本產品的理想使用效果，不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。
請于保質期內使用本產品，超出保質期，必須放棄使用。
傳代消化時切記不要消化過度，不宜超過5min，對細胞造成損傷，影響細胞狀態。
本產品僅用于科研用途，不能用于體外診斷。
